酶活性测定方法

有机体的生命活动表现了它内部化学反应历程的有序性，这种有序性是受多方面因素调节的，一旦破坏了这种有序性，就会导致代谢紊乱，产生疾病。酶活力受到调节和控制是区别于一般催化剂的重要特征。以下是微谱小编带来的酶活性测定方法！

酶活性测定项目

由于酶具有高度的专一催化活性，故可通过测定其相应的底物或产物浓度变化，或用某一反应产物或反应物浓度变化来确定其酶的活性。一般采用电化学和光物理的方法，即利用反应物或产物的吸光性，用紫外分光光度法或荧光法测定。若酶反应过程中产物或反应物有气体，则可用测压仪(瓦氏呼吸仪)测定。若反应过程中生成酸，则可用电化学法。用同位素标记的底物则可用放射化学法测定底物浓度变化，计算酶活性。一些性质稳定的酶，也可用高效液相色谱法检测。

酶活性测定方法

按反应时间分类法：

20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性，现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成，可以测酶反应的初速度，其结果远比固定时间法准确，在高浓度标本尤为明显，但本法也受到反应时间，反应温度，试剂等的影响，应加以注意。

（1）定时法：（两点法）

通过测定酶反应开始后某一时间段内（t1到t2）产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。

酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间，通过加入强酸、强碱、蛋白医学教育网整理沉淀剂等，使反应完全停止（也叫中止反应法）。加入试剂进入化学反应呈色测出底物和产物的变化。

该法基本的一点是停止反应后才测定底物或物的变化。

优点：简单易行，对试剂要求不高。

缺点：难保证测定结果的真实性。

难以确定反应时间段酶促反应是否处于线性期。随着保温时间的延续，酶变性失活加速。

（2）连续监测法：又称为动力学法或速率法、连续反应法。

在酶反应过程中，用仪器监测某一反应产物或底物浓度随时间的变化所发生的改变，通过计算求出酶反应初速度。

连续监测法根据连续测得的数据，可选择线性期的底物或产物变化速率用于计算酶活力。

因此连续监测法测定酶活性比定时法更准确。

实际工作中，采用工具酶的酶偶联法已经成为医学教育网整理应用*广、*频繁测酶活性浓度的方法。

（3）平衡法：通过测定酶反应开始***反应达到平衡时产物或底物浓度总变化量来求出酶活力的方法，又叫终点法。

按检测方法分类法：

①分光光度法；②旋光法；③荧光法；④电化学方法；⑤化学反应法；⑥核素测定法；⑦量热法。

酶活性测定标准

DINENISO12023-09-1106乳和乳制品碱性磷酸酶活性的测定第1部分:乳和乳制饮料荧光法

DINENISO32023-0909动物饲料肌醇六磷酸酶活性的测定

DINISO22023-09-1106土壤质量土壤脱氢酶活性的测定第1部分:三苯基四唑化氯法(TTC)

DINISO22023-09-1106土壤质量土壤脱氢酶活性的测定第2部分:氯化四氮唑法(INT)

GB/T5521-2008粮油检验谷物及其制品中α-淀粉酶活性的测定比色法

GB/T8622-2006饲料用大豆制品中尿素酶活性的测定

GB/T10361-2008小麦、黑麦及其面粉，杜伦麦及其粗粒粉降落数值的测定Hagberg-Perten法

标准号：AS2300.1.10-2008

标准名称：乳制品业的化学物理试验方法第1.10部分:一般方法和原则磷酸酶活性的测定

标准状态：有效

标准号：BS2023-09-1189

标准名称：油料种子残余物的分析方法.第6部分:大豆产品中脲酶活性的测定

标准状态：有效

标准号：DB37/T577-2005

标准名称：饲料添加剂6位点植酸酶活性的测定分光光度法

标准状态：有效

酶活性检测流程

1、在线咨询、电话沟通或面谈

2、寄送样品，特殊样品可提供上门取样服务

3、合同签订（付款）

4、样品分析检查工程师分析汇总报告

5、为您寄送报告，工程师主动售后回访，解决您的售后疑惑

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